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液相色谱柱填装过程中需要注意的问题
更新时间:2017-08-10 点击次数:1768

液相色谱柱、特别是液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是,只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。当然,目前大多数实验室多是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。但是在一些有特殊需要的情况下,或为节省经费,在实验室中自行填装液相色谱柱还是可取的。

液相色谱柱填装程序中应该注意的问题:

①高压操作的安全问题。常发生的问题是柱子与匀浆罐连接不牢,造成加压时柱头被高压冲下或柱子从匀浆罐上滑脱。此时,轻则填装失败,材料损失,重则造成人身伤害事故,一定要加以防范。除每次填装前均须仔细确认是否连接正确且牢靠外,还可加上由法兰盘和长螺杆组成的预防脱落装置,以防万一。

②通常,先填装的柱床较后填装的柱床紧密。因此,当使用时宜以相反的方向为宜,即让近匀浆罐一端作为使用时流动相的出口,而填装时的出口端则作为流动相的入口。

③新柱子使用前应以甲醇冲洗20-30min, 后,再改用流动相平衡。

④新柱子宜选适宜的标准样品进行评价并记录,以备存查和比较。

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