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2016-62
修饰肽纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capturechromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步zui关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速凝胶。经过浓缩的部分纯化的样品进行中级色谱(intermediatechromatography),目的是去除较难去除的杂质,此步zui关心的是分辨率,常采用高分辨率的细颗粒凝胶...
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2016-61
这个问题是常见的问题,就是一个PCR实验一直都做得很好,停一段时间后再做就不行了。一通乱找原因后还是不行,很痛苦!找问题要从大到小:1、PCR扩增体系问题用其他正在进行的且扩增正常的模板和引物证明PCR扩增体系没有问题,即PCR反应混合物、水、取液器、PCR仪、操作等都是好的(阳性对照)2、引物问题用以前扩增产物做模板(稀释50倍),证明引物没有问题3、只是模板问题了。因为样本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是样本中的抑制物过多(新鲜时没有溶出来)。不要靠运气找问...
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2016-531
2016-530
如今质粒纯化不再是什么难题,那么做了这么次质粒抽提的你了解质粒纯化的原理吗?你知道哪些步骤对质粒纯化的成功起着关键作用吗?QIAGEN质粒抽提简单原理:在碱性条件下裂解细菌之后,将裂解液以的盐浓度加入QIAGEN-tip当中。质粒DNA将发生选择性的结合而从RNA、蛋白质及其他细胞污染物中被分离出来。1、制备细胞裂解产物细胞产率很大程度上依赖于细胞裂解质量。因此制备澄清的细胞裂解产物是QIAGEN纯化方案中的重要一环,QIAGEN已经仔细针对*的裂解条件进行了相关的专业设计。...
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2016-520
凝胶成像系统的基本骨包含:CCD相机,暗室和分析软件。不过其功能不仅于对琼脂糠凝胶进行成像,现在的成像仪趋向于多功能化,还适用于蛋白胶、发荧光的胶、印迹膜和菌落平板等应用。在WesternBlot方面,高性能的CCD分子成像系统能与胶片媲美。CCD是电荷耦合器件(ChargeCoupledDevice)的英文名称缩写,是一种光电转换器件。是凝胶图像系统的核心部件。绝大多数对数码相机都有一定的了解,不少人还是这方面的专家。有人把数码相机的像素看得很重,但比较之后发现,有些400...
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