自动液相色谱分离层析仪是否一定要评价柱效？

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　　自动液相色谱分离层析仪是否一定要评价柱效？

　　总体来说，还是建议进行柱效评价的，但柱效评价标准不能一概而论。

　　高标准：1）分子筛层析；2）反相层析；3）疏水层析；4）采用阶性梯度或线性梯度洗脱的离子交换层析。此类层析对分离度有较高要求，有些需要采用多梯度洗脱或线性洗脱，如果柱效不佳，往往会造成峰扩散或拖尾，会对纯化效果产生很大影响。

 

　　低标准：1）亲和层析；2）采用单梯度洗脱的离子交换层析。此类层析仅需采用单梯度洗脱，有时在产物洗脱下来后，还要立即进行稀释，以防产物聚集，因此对分离度要求较低。然而，过于严重的峰扩散和拖尾，也是会影响纯化效率的，因此柱效测定也*。

 

　　仅要求峰型及对称性：流穿模式。此类模式为目标产物流穿，杂质被吸附，如果填料装填不均匀，或者过于松散，仍会导致吸附不匀而影响载量和处理量。因此，评估柱效时建议观察一下峰型及对称性，如果峰型平滑，且对称性良好，即可接受。

　　建议标准：0.8＜As＜1.5。当然，如果装填工艺稳定，甚至进行了工艺验证，该模式也可以不进行柱效评价。