网站导航

技术文章

当前位置:主页 > 技术文章 > 核酸蛋白分离层析仪的纯化方法
核酸蛋白分离层析仪的纯化方法
更新时间:2020-01-27 点击次数:1258
   核酸蛋白分离层析仪的纯化方法
  沉淀法
  (1)盐析沉淀法
  这是根据不同蛋白质在一定浓度的盐溶液中溶解度降低程度不同,而达到彼此分离的方法,是蛋白质和酶提纯工艺中较早采用,且至今仍广泛应用的方法。
 
  蛋白质易溶于水,因为其分子的-COOH-NH2和-OH都是亲水基团,这些基团与极性水分子相互作用形成水化层,包围于蛋白质分子周围形成1~100nm大小的亲水胶体,从而削弱了蛋白质分子之间的作用力。
 
  当大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子(如硫酸铵的SO42-和NH4+)有很强的水化力,可夺取蛋白质分子的水化层,使之"失水",于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。
 
  (2)等电点沉淀法
  是利用蛋白质在等电点时溶解度较低,而各种蛋白质具有不同的等电点来分离蛋白质的方法,称为等电点沉淀法。
 
  由于等电点时蛋白质的净电荷为零,失去了水化膜和分子间的相斥作用,疏水性氨基酸残基暴露,蛋白质分子相互靠拢聚集,易形成沉淀析出。
 
  (3)有机溶剂沉淀法
  此法原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇等)能使某些蛋白质在水中的溶解度显著降低。在室温下,有机溶剂不仅能够引起蛋白质的沉淀,而且伴随变性。
 
  因此,通常要将有机溶剂冷却,然后在不断的搅拌下加入有机溶剂,以防止局部浓度过高,蛋白质变性问题就可以很大程度上得到解决。
 
  用此法析出的沉淀一般比盐析法易过滤或离心沉降,分离后的蛋白质沉淀应立即用水或者缓冲液溶解,以达到降低有机溶剂的浓度的目的。此法在血液制品的制备过程中较多使用。

联系方式

邮件:sh-jiapeng@163.com
传真:021-36162369
邮编:200444
地址:上海市真陈路1398弄15号
在线客服 联系方式 二维码

服务热线

021-66030766

扫一扫,关注我们